安益譜 TQ9100 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)在人血漿中變腎上腺素類物質(zhì)及 3-甲氧酪胺含量測定中的應(yīng)用
一、引言
變腎上腺素類物質(zhì)(如腎上腺素、去甲腎上腺素等)和 3-甲氧酪胺是人體重要的神經(jīng)遞質(zhì)及其代謝產(chǎn)物,其在人血漿中的含量測定對于生理功能研究、疾病診斷以及藥物療效評估具有重要意義。ANYEEP TQ9100 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)憑借其高靈敏度、高選擇性和高精度的檢測能力,為這些生物胺類物質(zhì)的準(zhǔn)確定量提供了一種可靠的方法。
安益譜TQ9100三重四極桿液質(zhì)聯(lián)用儀
二、儀器配置與測試條件
(一)儀器配置
- 液相色譜系統(tǒng):配備高效液相色譜泵、自動進(jìn)樣器和柱溫箱。
- 質(zhì)譜系統(tǒng):ANYEEP TQ9100 三重四極桿質(zhì)譜儀,配備電噴霧離子源(ESI)。
- 色譜柱:適合分析生物胺類物質(zhì)的 C18 反相色譜柱。
- 流動相:優(yōu)化的水相和有機相溶劑,含適量酸或緩沖鹽以改善分離效果。
- 計算機與軟件:用于數(shù)據(jù)采集、處理和分析的專業(yè)軟件。
(二)測試條件
- 液相色譜條件:
- 流速:0.3 mL/min。
- 柱溫:35℃。
- 進(jìn)樣量:10 μL。
- 梯度洗脫程序:根據(jù)目標(biāo)化合物的極性,設(shè)計合適的梯度洗脫程序以實現(xiàn)有效分離。
- 質(zhì)譜條件:
- 離子源溫度:350℃。
- 傳輸線溫度:300℃。
- 掃描模式:多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)模式,針對每種目標(biāo)化合物選擇特定的母離子和子離子對進(jìn)行監(jiān)測。
- 電離模式:正離子模式。
三、測試方法
(一)樣品前處理
人血漿樣品需經(jīng)過適當(dāng)?shù)那疤幚硪匀コ鞍踪|(zhì)、雜質(zhì),并富集目標(biāo)化合物。通常采用蛋白質(zhì)沉淀法,加入適量的甲醇或乙腈使蛋白質(zhì)沉淀,離心后取上清液進(jìn)行分析。也可采用固相萃取法進(jìn)一步凈化和富集樣品。
(二)定性與定量分析
- 定性分析:通過與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間和特征離子對進(jìn)行比對,對目標(biāo)化合物進(jìn)行定性鑒定。
- 定量分析:采用外標(biāo)法進(jìn)行定量,以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度和對應(yīng)的峰面積建立校準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品中目標(biāo)化合物的峰面積計算其含量。
(三)校準(zhǔn)與質(zhì)量控制
- 校準(zhǔn)曲線:配置一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,進(jìn)樣分析后以峰面積對濃度作圖,得到線性回歸方程。
- 質(zhì)量控制:在樣品分析過程中,定期插入質(zhì)量控制樣品以監(jiān)測儀器的穩(wěn)定性和方法的準(zhǔn)確性。
四、測試結(jié)果與分析
(一)校正曲線
各目標(biāo)化合物的校正曲線均顯示出良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)(R2)均大于 0.99,表明在測試濃度范圍內(nèi)儀器對這些化合物的響應(yīng)具有良好的線性。
(二)重復(fù)性測試
對同一濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行多次重復(fù)進(jìn)樣分析,計算目標(biāo)化合物的保留時間和峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。結(jié)果表明,保留時間的 RSD 均小于 0.5%,峰面積的 RSD 均小于 5%,說明儀器具有良好的重復(fù)性和穩(wěn)定性。
(三)靈敏度與檢出限
TQ9100 系統(tǒng)對變腎上腺素類物質(zhì)和 3-甲氧酪胺展現(xiàn)出高靈敏度,檢出限低至 pg/mL 級別。以信噪比(S/N)=3 計算方法檢出限,各目標(biāo)化合物的檢出限均滿足實際樣品檢測要求,能準(zhǔn)確測定人血漿中低濃度的目標(biāo)化合物。
(四)實際樣品測定
將該方法應(yīng)用于人血漿樣品的測定,成功檢測到變腎上腺素類物質(zhì)和 3-甲氧酪胺的存在。通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,準(zhǔn)確計算出樣品中各目標(biāo)化合物的含量,為生理功能研究和臨床診斷提供了有價值的數(shù)據(jù)。
五、結(jié)論
ANYEEP TQ9100 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜系統(tǒng)在人血漿中變腎上腺素類物質(zhì)及 3-甲氧酪胺含量的測定中表現(xiàn)出色。其高靈敏度、高選擇性和高精度的檢測能力,結(jié)合優(yōu)化的液相色譜和質(zhì)譜條件,實現(xiàn)了對這些生物胺類物質(zhì)的準(zhǔn)確定量分析。該方法具有良好的線性、重復(fù)性和靈敏度,適用于人血漿樣品的常規(guī)檢測和研究分析,為相關(guān)領(lǐng)域的研究提供了有力的技術(shù)支持。